<menu id="ssssw"><table id="ssssw"></table></menu>
  • <rt id="ssssw"><samp id="ssssw"></samp></rt>
  • <bdo id="ssssw"></bdo>
  • Your Good Partner in Biology Research

    跨膜蛋白

    跨膜蛋白(TP),也稱為整合膜蛋白,占膜蛋白總量的70%~80%。其主要特征是不溶于水,其氨基酸組成疏水性強,也有親水性氨基酸,由疏水性氨基酸組成的部分,深入脂雙層的疏水區,與脂肪酸鏈共價結合,它們可分布在脂雙分子層中或跨越全膜??缒さ鞍自诨旧磉^程中起著重要作用,包括分子運輸、信號轉導和能量利用等。一方面,它們可用于向細胞傳遞外部環境的信號。另一方面,它們充當接收器收集有關外部環境信號。

    跨膜蛋白是目前最主要的藥物靶點,占現階段己知藥物靶點的60%以上,以跨膜蛋白為靶點的創新藥研發一直是醫藥領域的研究熱點。由于跨膜蛋白具有疏水親脂的跨膜域,必須借助細胞膜的磷脂雙分子層這一特殊環境來維持正確結構、保持生物活性,同時跨膜次數越多其具有的疏水親脂跨膜區越多,在宿主細胞中表達水平越低,制備難度越大,因此體外制備有活性的跨膜蛋白是目前公認的技術難題。

    具有全長完整結構的多次跨膜蛋白在藥物研發中具有重要意義。為助力跨膜蛋白靶點藥物的開發,華美生物在原有大腸桿菌、畢赤酵母、哺乳動物細胞桿狀病毒-昆蟲細胞四大表達系統的基礎上,開發出表達跨膜蛋白的無細胞和基于哺乳細胞的病毒樣顆粒(VLPs)兩大核心技術,并成功制備200余種跨膜蛋白,包含CCR8、C5AR1、Claudin-18.2等多個熱門靶點。

    產品優勢

    ● 多種膜蛋白表達策略

    針對跨膜蛋白,華美生物開發出三大優勢蛋白表達平臺,應用無細胞表達技術結合去垢劑助溶Nanodisc磷脂層結構技術,哺乳細胞表達結合VLPs技術,幫助跨膜蛋白形成正確的構象,使其具有生物活性,以滿足相關研究及檢測使用。

    病毒樣顆粒 (VLPs) 技術平臺

    VLPs是由多個病毒的一種或者多種衣殼蛋白自動組裝形成的納米級別的微小顆粒。VLPs顆粒不含病毒核酸,不能進行自主復制,安全性高,具有與病毒顆粒類似的整體結構。

    華美生物搭建了基于HEK293表達系統的包膜VLPs技術平臺,所制備的包膜VLPs在其固有的囊泡膜上顯示正確折疊的多次跨膜蛋白,展示完整的生物活性。

    去垢劑技術平臺

    去污劑是同時具有親水極性基團和疏水非極性基團的雙極性分子,能夠使脂膜解體釋放膜蛋白,并在溶液中為去膜狀態下的膜蛋白提供疏水環境,維持膜蛋白的疏水跨膜結構。

    華美生物搭建了基于無細胞表達的去垢劑技術平臺。通過體外添加DNA模板、ATP、氨基酸、各種底物、細胞抽提物的酶等合成蛋白質,篩選不同去垢劑來提取目的蛋白,可很好溶解純化跨膜蛋白,幫助其在溶液中形成天然正確構象。

    Nanodisc技術平臺

    在含有去垢劑的緩沖液中,大部分膜蛋白可以維持穩定性和活性。但少數對去垢劑敏感的膜蛋白是不適宜含有去垢劑的緩沖條件的,具體表現為無法純化,穩定性不好和沒有活性。

    華美生物搭建了基于無細胞表達的Nanodisc技術平臺。通過體外添加MSP,磷脂分子使其在反應過程中邊表達邊組裝成Nanodisc結構,保持其生物學活性并有很好的水溶性。

    ● 多平臺驗證

    華美生物應用WB技術驗證跨膜蛋白特異性,采用功能性ELISA/SPR/FACS等多種蛋白應用分析技術驗證跨膜蛋白活性,并通過SEM方法驗證跨膜蛋白正確組裝,確保給客戶提供高活性、高純度、構象正確的全長跨膜蛋白。

    WB驗證跨膜蛋白特異性

    CLDN18.2 (CSB-MP005498HU(A5)) (4 times) is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody. The three bands respectively correspond to monomer, Homodimer, Homotrimer.

    CD20 (CSB-MP015007HU) (4 times) is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

    功能性ELISA驗證跨膜蛋白生物活性

    Immobilized ABCD1 (CSB-CF001068HU) (5 times) at 5 μg/ml can bind human PEX19, the EC50 of human PEX19 is 22.96-33.00 μg/ml.

    Immobilized ACKR1 (CSB-CF624105HU) (7 times) at 1 μg/ml can bind human CCL2, the EC50 of human CCL2 protein is 48.64-60.24 μg/ml.

    經SPR驗證跨膜蛋白生物活性

    Human EGF protein captured on COOH chip can bind Human EGFR protein, his and Myc tag (CSB-MP007479HU) with an affinity constant of 11.9nM as detected by LSPR Assay.

    SEM驗證跨膜蛋白正確組裝

    The VLP-like structures of CLDN18.2 (CSB-MP005498HU(A5)) (4 times) has been confirmed by TEM.

    The VLP-like structures of CD20 (CSB-MP015007HU) (4 times) has been confirmed by TEM.

    產品目錄

    你可以在下述列表中尋找您所需要的產品,或者直接在頂部搜索框中進行搜索;

    如果您找不到所需的重組蛋白,請聯系客服咨詢,或選擇華美生物無風險重組蛋白定制服務。

    產品名稱 貨號 規格
    Recombinant Halobacterium salinarum Cobalamin import system permease protein BtuC(btuC) CSB-CF532244HTL(A4) 100μg/20μg
    Recombinant Human Steroidogenic factor 1(NR5A1) CSB-CF623795HU 100μg/20μg
    Recombinant Human Adiponectin receptor protein 1(ADIPOR1),partial CSB-CF001367HU2 100μg/20μg
    Recombinant Human G protein-coupled receptor 20 variant CSB-CF3008HU 100μg/20μg
    Recombinant Human Melanocyte-stimulating hormone receptor(MC1R) CSB-CF086369HU 100μg/50μg/10μg
    Recombinant Mouse Steroidogenic factor 1(Nr5a1) CSB-CF016065MO 100μg/20μg
    Recombinant Mouse Sialidase-4(Neu4) CSB-CF803970MO 100μg/20μg
    Recombinant Escherichia coli Lactose permease(lacY),partial CSB-CF365806ENV1 100ug/20ug
    Recombinant Rice Amino acid permease(AAP6) CSB-CF3147OCO 100ug/20ug
    Recombinant Human Immunoglobulin superfamily member 1(IGSF1) CSB-CF854051HU(A4) 100ug/20ug
    Recombinant Escherichia coli Colicin-E5(col),partial CSB-CF323819ENL1 100ug/20ug
    Recombinant Human Small integral membrane protein 4(SMIM4) CSB-CF823889HU 100ug/20ug
    Recombinant Human coronavirus NL63 Envelope small membrane protein(E) CSB-CF764822HIX 100ug/20ug
    Recombinant Influenza A virus Matrix protein 2(M) CSB-CF356944IFZ 100ug/20ug
    Recombinant Mouse Ninjurin-1(Ninj1) CSB-CF015808MO 100ug/20ug
    Recombinant Human E3 ubiquitin-protein ligase RNF5(RNF5) CSB-CF857879HU 100ug/20ug
    Recombinant Human herpesvirus 6A Glycoprotein U22(U22) CSB-CF718168HJZ 100ug/20ug
    Recombinant Human herpesvirus 6B Protein U22(U22) CSB-CF889529HKA 100ug/20ug
    Recombinant Human herpesvirus 1 Envelope glycoprotein G(gG) CSB-CF361844HWY 100ug/20ug
    Recombinant Human coronavirus NL63 Membrane protein(M) CSB-CF757672HIX 100ug/20ug

    Q&A

    Q:可否詳細介紹下幾個平臺是如何表達及組裝跨膜蛋白的?

    A: VLPs平臺——包膜病毒衣殼蛋白表達過程中可以自我組裝成納米顆粒,目的蛋白(跨膜蛋白)表達之后定位在細胞膜上,VLP通過出芽的方式釋放出去,釋放的過程中會和細胞膜整合(細胞膜上有目的蛋白),釋放后的納米顆粒(即VLPs顆粒)包膜上會展示跨膜蛋白。

    去垢劑平臺——大腸桿菌無細胞表達,之后用去垢劑溶解純化。

    Nanodiscs平臺——大腸桿菌無細胞表達過程中添加膜骨架蛋白(MSP)和磷脂分子(DMPC)使其邊表達邊組裝成nanodiscs。

    Q: 以上所有平臺的膜蛋白制備過程中,是否有用到任何的病毒或者病毒載體?

    A:哺乳包膜VLPs即包膜病毒樣顆粒,是由病毒一個或幾個結構蛋白自行組裝成不含病毒基因組且不能復制、不具有感染能力,只是形態結構上類似完整病毒,并不含有病毒核酸物質,是安全的?,F在不少疫苗也會選擇該技術,可見其是安全的。

    Q:Nanodisc平臺用的脂質體和膜骨架蛋白分別選擇了多少種進行組合,是否針對每個項目優化組合?

    A:華美生物在前期平臺研發階段嘗試了多種膜骨架蛋白和磷脂分子,進行了正交組合嘗試,最終篩出了一對最適的膜骨架蛋白和磷脂分子,可成熟針對不同項目。

    文獻引用

    The chemokine CCL1 triggers an AMFR-SPRY1 pathway that promotes differentiation of lung fibroblasts into myofibroblasts and drives pulmonary fibrosis, Immunity, 2021.

    Altered T cell subpopulations and serum anti-TYRP2 and tyrosinase antibodies in the acute and chronic phase of alopecia areata in the C3H/HeJ mouse model K Hashimoto, Journal of Dermatological Science, 2021.

    Effect of Vitamin B2 and Vitamin E on Cancer-Related Sarcopenia in a Mouse Cachexia Model T Mori, BioMed, 2021.

    MicroRNA-21-containing microvesicles from tubular epithelial cells promote cardiomyocyte hypertrophy Min Yang, Renal Failure, 2021.

    An ultrasensitive electrochemical sensing platform for the detection of cTnI based on aptamer recognition and signal amplification assisted by TdT M Lang, RSC Advances, 2020.

    相關資源

    跨膜蛋白介導細胞與細胞外環境間的信號傳導,并執行許多重要的細胞生物學功能。例如,它是各種信號分子、激素和其他底物的受體;它參與細胞膜內部和外部之間物質、能量和信號的交換;它構成了各種離子跨膜的通道,該通道將營養物質和一些無機電解質輸入細胞,并將有毒或無用的代謝產物排放到細胞中。

    由于無細胞表達系統的獨特優勢,它們在跨膜蛋白表達中起著重要作用。

    在無細胞表達系統中,我們可以修飾跨膜蛋白。比如可以將非天然氨基酸添加到蛋白質表達中,以實現在常規重組表達后難以解決的復雜修飾過程。

    由無細胞表達系統表達的跨膜蛋白產物可用于研究跨膜蛋白的功能??缒さ鞍渍系侥遗葜羞M行結構和功能研究是膜蛋白研究的熱門話題。?

    無細胞表達系統表達的跨膜蛋白類型和功能是多種多樣的。目前熱銷的跨膜蛋白包含以下幾類:

    ATP結合轉運盒蛋白(ABC)可以結合和水解ATP,并利用能量驅動各種分子穿過質膜以及內質網(ER)、過氧化物酶體和線粒體內膜。它參與脂質膜上特定分子的運輸以及所有生物體的抗性。

    水通道蛋白(AQP)是一種位于細胞膜上的蛋白(內膜蛋白),它可在細胞膜上形成“通道”,從而控制水流入和流出細胞的過程。

    目前,我們已經通過無細胞表達系統成功開發了一些具有活性的水通道蛋白。其中,洗滌劑在膜蛋白的提取,純化和操作中起著重要作用。若要了解有關在水通道蛋白中使用洗滌劑的更多信息,本文可能會為您提供幫助:Detergent的性質及其在膜蛋白中的應用

    G蛋白偶聯受體(GPCR)是一類膜蛋白受體的總稱。它能與細胞外分子結合并激活內部信號轉導途徑,最終激活細胞反應。 GPCR介導涉及視覺控制、腎臟功能、腫瘤發生、免疫反應和炎癥的信號。

    人類白細胞抗原(HLA)是一種位于人體細胞表面專門向T細胞呈遞短肽的蛋白質或抗原,在人體的免疫防御中起關鍵作用。HLA的臨床應用主要是器官移植中供體和受體匹配。

    Ion channel

    離子通道(Ion channel)是各種無機離子跨膜的被動傳輸途徑,是活細胞進行代謝活動和物質交換的重要途徑。離子通道對于實現細胞的各種功能具有重要意義。



    1v1周青梅郑宣木天寥
    <menu id="ssssw"><table id="ssssw"></table></menu>
  • <rt id="ssssw"><samp id="ssssw"></samp></rt>
  • <bdo id="ssssw"></bdo>